Ақпарат

Иммерсиондық майды қолдану үшін дымқыл қондырғы қажет пе?

Иммерсиондық майды қолдану үшін дымқыл қондырғы қажет пе?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Слайдты батыру майды қолдануға дайындаған кезде, үлгіні ылғалдандыру керек пе? Мен мұны тек лакпен жасай аламын ба?

Мен саңырауқұлақ спораларын дайындаймын.

Ылғалды орнату үшін суды пайдалану сізге белгілі бір уақыт шегін береді. Сіз суды буланғанға дейін өз жұмысыңызды істеуіңіз керек, әйтпесе x100 кіші өзендер пайда болады.


Слайдты батыру майды қолдануға дайындаған кезде, үлгіні ылғалдандыру керек пе? Мен мұны тек жапқышпен жасай аламын ба?

Ең дұрысы, сіз оны батыру майымен бірге қолданбауыңыз керек. Сіз монтаждау құралының индексін батыру майының индексіне мүмкіндігінше сәйкес келтіруіңіз керек, әйтпесе сіз кескіннің ажыратымдылығы мен контрастын төмендетесіз. Қараңыз:

http://www.microbehunter.com/the-importance-of-mounting-medium-refractive-index/

Ылғалды орнату үшін суды пайдалану сізге белгілі бір уақыт шегін береді. Сіз суды буланғанға дейін өз жұмысыңызды істеуіңіз керек, әйтпесе x100 кіші өзендер пайда болады.

Индексті бекіту құралдарының көптеген нұсқалары бар, олар сіздің үлгіңізді ауамен қатар сақтайды.


Жауап мынада, сіз жабындыны сумен бекітпей батыру майын пайдалана алмайсыз.

Мен сынап көрдім.

Су қондырғысы қаптаманы сырғанаққа «желімдейді» және оны орнында бекітеді. Мұны жасамай, батыру майын қосқанда, жабын сырғып кетеді, себебі май жабынды «ұстап алады». Сахнаны жылжытқанда, жабын объективке жабысып қалады және сахнадағы сырғанақ қозғалады, бірақ жабын қозғалмайды, себебі ол линзаға жабысады.

Қаптаманы суға салғанда, ол соншалықты берік бекітілген, оны бекіту тіпті қиын Басыңыз оны тырнақпен.

Қорытынды: Суға арналған қондырғысыз батыру майы жоқ!


14: Микроскопты пайдалану

Микроскоп микробиология зертханасы үшін өте қажет: кейбір саңырауқұлақтардан басқа микроорганизмдердің көпшілігін микроскоптың көмегінсіз көру мүмкін емес. Және, әрине, вирустар сияқты электронды микроскоп болмаса, микроскоппен де көрінбейтін кейбір микробтар бар.

Сіз семестр бойы түрлі зертханалық жаттығулар үшін тағайындалған жарық микроскопын қолданасыз, тоған суын қарауға және белгісіз бактерияңызды анықтауға дейін. Сондықтан микроскопты тиімді пайдалану мен микроскопияның әр түрін қалай қолдану керектігін түсіну өте маңызды ----жарық алаңы, фазалық контраст, және қараңғы алаң. Фазалық контраст және қараңғы өріс микроскоптары дымқыл бекіткіштер үшін пайдаланылады, ал жарық өрісті ылғалды бекіткіштер үшін де, боялған үлгілер үшін де пайдалануға болады..

Сіз сондай -ақ бактериялық жағынды дайындауға және оны кейін бояуға алғашқы әсер аласыз. Дегенмен, сіз қарапайым бояуды жасайсыз, тек бір бояғышты қолданыңыз. Слайдтағы барлығы бірдей түсті болады, бірақ сіз бактериялардың пішіндерін, өлшемдерін және орналасуын ажырата аласыз.


Батырмалы майды қолдану үшін дымқыл бекіту қажет пе? - Биология

Микроскоп микробиология зертханасы үшін өте қажет: кейбір саңырауқұлақтардан басқа микроорганизмдердің көпшілігін микроскоптың көмегінсіз көру мүмкін емес. Әрине, вирустар сияқты электронды микроскоп болмаса, микроскоппен де көрінбейтін кейбір микробтар бар.

Сіз семестр бойы түрлі зертханалық жаттығулар үшін тағайындалған жарық микроскопын қолданасыз, тоған суын қарауға және белгісіз бактерияңызды анықтауға дейін. Сондықтан микроскопты қалай тиімді пайдалану керектігін және микроскопияның әртүрлі түрлерін қалай пайдалану керектігін түсіну өте маңызды—-жарық алаңы, фазалық контраст, және қараңғы алаң. Фазалық контраст және қараңғы өріс микроскоптары дымқыл бекіткіштер үшін пайдаланылады, ал жарық өрісті ылғалды бекіткіштер үшін де, боялған үлгілер үшін де пайдалануға болады..

Сіз сондай-ақ бактериялық жағынды дайындау және оның кейінгі бояуы бойынша алғашқы экспозицияны аласыз. Дегенмен, сіз қарапайым бояуды жасайсыз, тек бір бояғышты қолданыңыз. Слайдтағы бәрі бірдей түсті болады, бірақ сіз бактериялардың пішінін, өлшемін және орналасуын ажырата аласыз.

КЕРЕК МАТЕРИАЛДАР

  • микроскоп
  • тоған суы
  • микроскоп слайдтары
  • қақпақ жапқыштары
  • май тамызғыш
  • слайдтар дайындалды Бациллус
  • тіс тазалағыштар
  • бояу жинақтары

Рәсімдер

Микроскопты қолдану бойынша төменде көрсетілген бөлімдерді қараңыз.

Ылғалды тоған суын дайындаңыз (бар болса)

  1. Мүмкіндігінше протозоа мен балдырлардың жақсы үлгісін алу үшін балдырлар мен батпақтарға түсіңіз.
  2. 10X көмегімен үлгіге назар аударыңыз, содан кейін 40X (ЕМЕС 100X). Жарық өрістен бастаңыз, содан кейін қараңғы өріске және фазалық контрастқа ауысыңыз (төмендегі нұсқауларды қараңыз).
  3. Микроскоппен, конденсаторлардың параметрлерін өзгертумен, әртүрлі линзаларды қолданумен жаттығу. Қарапайымдылар мен балдырларды анықтау маңызды ЕМЕС.

Тістер арасындағы материалға жағынды және қарапайым дақ дайындаңыз.

  1. Залалсыздандырылған тіс тазартқышты алыңыз, даналық тістеріңіздің арасындағы қатты материалды алыңыз да, оны бір тамшы суға араластырыңыз, сонда сізде микроскоптың үштен бір бөлігіне суспензия болады. ЕШҚАНДАҒЫ ҚАМТЫРУ ҚОЛДАНЫЛМАЙДЫ!
  2. Слайд жіберіңіз ауада құрғақ.
  3. Жылуды түзету слайдты жалынмен бірнеше рет жылдам жүргізу арқылы құрғақ жағынды. Егер саусақтарыңыз қызып кетсе, сізде ТОО КӨП қызу бекітілген.
  4. Слайдты дақ табақшасының үстіне сымға қойыңыз. Жағынды кристалды күлгінмен сулаңыз: 1 минут отырыңыз.
  5. Слайдты тазартылған сумен жақсы жуыңыз. Жағынды слайдты библиялық қағаз жастықшасымен сүртіңіз.
  6. 10X объективті пайдаланып үлгіге назар аударыңыз (Жарық өрісінің микроскопиясында екеніңізге сенімді болыңыз): сіз күлгін материалдың массасын көруіңіз керек, олардың көпшілігі көру үшін тым кішкентай.
  7. Қазір 100X өтуге дайынсыз ба? Істемеу сахнаны немесе реттеу түймелерін алдыңызға жылжытыңыз төмендегі нұсқауларды орындаңыз.
  8. Аузыңыздағы бактериялардың әр түрлі формасы мен орналасуын анықтаңыз. Олардың көпшілігі таяқша немесе кокк тәрізді болады, бірақ кейбір спириллаларды көру сирек емес. Бактериялар мен#8212 жұптардың, кластерлердің, тізбектердің орналасуына назар аударыңыз ба?
  9. Жағындылар үшін пайдаланатын кез келген слайд тазалау және қайта пайдалану үшін слайд қорабына қайтарылады.

Дайын бактериялық жағындыларды қараңыз

  1. Бұл дақтарды жағылған жағындылар сатып алынғандықтан, олардың үстінде қақпақша бар. Сіз әлі де майды батыратын линзамен майды қолданасыз.
  2. Науалардағы майды ауыстырмас бұрын, кез келген майды АЛУды ұмытпаңыз.

МИКРОСКОПТЫҢ САХНАСЫНА СЛАЙДТЫ ҚОСУ АЛДЫНДА

  1. Микроскоптан барлық құрылымдарды табыңыз (жаттығулардың соңындағы диаграммалар) олардың функцияларын білетіндігіңізге сенімді болу. Конденсаторды айналдырыңыз, сонда сіз барлық параметрлерді көресіз (ақ әріптер конденсатор дискісінің алдыңғы жағына жазылған). Сондай-ақ, жарық мөлшеріне әсерін көру үшін ирис диафрагмасын солға және оңға жылжытыңыз.
  2. Көтеріңіз Конденсатор сатысы БАРЛЫҚ ЖОЛДА. Конденсатор сатысына арналған арнайы тұтқа бар механикалық кезең. Конденсатор шамдағы барлық қолжетімді жарықты жинап, оны сахнаға бағыттайды. Микроорганизмдерді қарау кезінде бізде әрқашан механикалық сатыға ең жақын конденсатор сатысы болады. Құрт немесе жәндіктер сияқты ірі заттарды көргенде, үлгіні түсетін жарық тығыздығын жақсарту үшін конденсаторды төмен қарай жылжытуға болады, бірақ микроорганизмдер үшін емес.
  3. Бұраңыз жарықтылықты басқару тұтқасы жоғары қарай, содан кейін айналымның 1/4 бөлігін артқа тастаңыз. Басқару тұтқасы осы жерде қалады: оны қайтадан ұстамаңыз. Конденсатор арқылы түсетін жарық мөлшеріңіз арқылы басқарылады ирис диафрагмасы.
  4. айналдырыңыз айналмалы мұрындық дейін төмен қуатты 10X объективті линза орнына түседі.
  5. көмегімен сахнаны толығымен көтеріңіз өрескел реттеу тұтқасы. Линзаның сахнаға құлап кетпеуіне көз жеткізу үшін слайд пен линза арасындағы қашықтықты қадағалаңыз.
  6. Барлық линзаларды (көз, объективті линзалар және конденсатордағы линзалар) көмегімен тазалаңыз ЛИНЗА ҚАҒАЗЫ.
  7. Көз линзаларын сіздің бетіңізге сәйкес қашықтыққа қойыңыз (көзді жеке қажеттіліктеріңізге қарай бір -бірінен алыстатуға немесе жақындатуға болады). Мыналар көз окуляры линзалардың екеуі де 10 есе ұлғайтады.

ҮЛГІНІ КӨРУ ҮШІН

  1. Ылғал бекіткішті немесе жағынды сахнаға қойып, оны ішіне бекітіңіз сахналық клиптер.
  2. Үлгі слайдта қай жерде орналасқанын анықтауға тырысыңыз және оны жарық арқылы өтетін тесіктің ортасына қойыңыз.
  3. Көздің окуляры арқылы қарап жатқанда, оны төмендетіңіз кезең Дөрекі реттеу тұтқасын БАЯН. Микроскоптың бинокулярлы басы арқылы ЕКІ көзіңізбен қарап жатқаныңызға көз жеткізіңіз.
  4. Үлгіні көрген бойда, өрескел реттеуді тоқтатып, дәл реттеу тұтқасына ауысыңыз. Дөрекі реттеу тұтқасымен ең басында фокусталғаннан кейін, ҚАЙТА ТҮСІЛМЕЙДІ. Енді барлық назар фокуспен жасалады дәл реттеу тұтқасы.
  5. МІНДЕТТЕРДІ ӨЗГЕРТУ:

Микроскоптың линзалық жүйелерінің көпшілігі ПАРФОКАЛДЫҚ—мақсаттар басқа объективке айналдыру үлкен фокуссыз орындалатындай етіп тураланған. 40X линзасын орнына бұраңыз, ол орнына түскеніне көз жеткізіңіз. Сіздің үлгі әлі көру аймағында көрінуі керек, бірақ қазір 4 есе үлкен. Нысандарды нақтылау үшін дәл реттеу түймесін пайдаланыңыз.

ЕГЕР сіздің көзқарасыңыз бұлыңғыр болса және назардың бірде -бір шамасы объективті қарауға әкелмесе, сізде 40X мақсатта мұнай қалдықтары бар шығар. ЛИНЗА ҚАҒАЗЫМЕН ЖАҢА ТАЗАЛАУ КЕРЕК.


Ұсынылған үлгілер

Жұмыс кезінде бақылауларыңызды жазбалармен, эскиздермен және өлшемдермен жазыңыз. Әрбір слайдты қалай дайындағаныңызды, әрбір үлгіні қалай орналастырғаныңызды және бақылағаныңызды және конденсатор параметрі мен объективті линзаның қандай комбинациялары әр мақсат үшін ең жақсы жұмыс істейтінін ескеріңіз. Сіз барлық үлгілерді бақылауыңыз қажет емес. Қажетті препараттар жұлдызшамен белгіленген.

Уақытты басқару

Әр үлгіні дайындауға және бақылауға қанша уақыт кететінін есептеп, алдын ала жоспарлаңыз. Егер сіз олардың барлығын бақылай алмасаңыз, төтенше жағдайдың жоспарын құрыңыз және ноутбукті аяқтауға біраз уақыт (бес минут) үнемдеңіз. Өнімділік деңгейінің бір бөлігі сіздің қаншалықты тиімді жұмыс жасайтындығыңызға байланысты, оның ішінде зертханалық кезеңнің жоспарланған соңына дейін аяқталуы немесе аяқталмауы.


Ылғал қондырғыны дайындаған кезде су тамшысының үстіне лампа қою неге маңызды?

Әдетте біз қою the үлгі бірнешеуінде су тамшылары біз қарап отырған кезде ол кеуіп кетпеуі үшін. The су жарықтың өтуіне де көмектеседі үлгі біркелкі. Қорғау үшін үлгі ішінде су тамшылары слайдта оны қаптама деп аталатын өте жұқа әйнекпен жабу керек.

Сондай-ақ, дымқыл монтажды дайындаудың құндылығы қандай? Ылғалдың құны қандай-бекітуге дайындық клиникалық зертханада? The дымқылдың құны-орнату Клиникалық зертханада дайындық - тірі үлгіні көре алады және ағзаның сәйкестігіне көмектесетін моториканы іздей алады.

Сондай-ақ, дымқыл тіреуіштің мақсаты не екенін біліңіз?

микроскоптың линзасын үлгіден қорғау және көру үшін тегіс бетті қамтамасыз ету.

Ылғалды монтаждау мен құрғақ монтаждық дайындықтың айырмашылығы неде?

Құрғақ бекітпе үлгіні су қоймай тікелей слайдқа қоюды білдіреді. Ылғал қондырғы үлгіні орналастыруды білдіреді жылы слайдтағы су тамшысы, содан кейін оны қақпақпен жабыңыз.


Үлкейту шектері

Микроскоптар үшін максималды пайдалы үлкейту жарықтың үлкейту күшінің шегіне байланысты 1000x-1200x шамасында болады. Белгілі бір уақытта кескін үлкейген сайын үлкейе береді, бірақ ажыратымдылық бірдей нашар болады. Үлкейту туралы көбірек білу үшін микроскоптың ұлғайту бөлімін қараңыз: Түсіндірілген.

Егер сіз өзіңіздің ең жоғары қуат мақсатыңызға қол жеткізген болсаңыз, бірақ оны фокусқа аудара алмасаңыз, микроскоптағы ең жоғары қуатты мақсат - бұл 100Х майды батыру. Бұл мақсаттар - бұл объектив пен слайдтағы үлгінің үстіндегі слайдтың арасында суға батырылатын май тамшысының болуын талап ететін мамандандырылған мақсаттар. Сіз бұл мақсатқа батыру майынсыз назар аудара алмайсыз. Суға батыру майын қалай қолдану керектігі туралы толық нұсқаулық алу үшін және осы мақсатта бір нәрсеге назар аудару үшін суға батыру майы не үшін қажет екенін осы жазбадан қараңыз.


Сізге қандай көмек қажет?


Микроскопты қалай дұрыс қолдану керек! Сауда -саттықтың фокустары Сіздің өміріңізді жасау үшін жасалған Жеңілірек!

Біріншіден, микроскоптың бағасы арасында 600 және 800 доллар, бірнеше жолдарын табуға тырысайық САҚТАУ мен есеп айырысуым керек СІЗ біреуін ауыстыру құны үшін! Құнның бір бөлігі электронды микроскоптарды ескермейтін уақыт өте келе жеңіл микроскоп құрылымының керемет жетістіктеріне байланысты!

Типтік микроскоптың бөліктері
Қосымша ақпарат алу үшін бөліктерді басыңыз!

Сары = Абайлаңыз

ЕСКЕРТПЕ: Микроскопта кейбір түстер басқаша болуы мүмкін.
Жоғарыдағы кестенің жанында дұрыс түстер мен ұлғайтуларға назар аударыңыз.

1.Барлық рюкзактар ​​екеніне көз жеткізіңіз дәліздерден микроскопты алмас бұрын! Микроскопты әрқашан бір қолыңызбен ұстаңыз Қол және бір жағынан Негіз. Оны алып жүріңіз денеңізге жақын.
2.Қақпақты алыңыз, микроскопты розеткаға қосыңыз және артық сымды салыңыз үстелдің үстінде! Артық сымның шетінен салбырап тұруына жол берсеңіз, тізеңіз оған жабысып қалуы мүмкін және келесі еститін дыбыс өте қымбат апат. Мен сізге кейінірек есеп беремін!

3. Әрқашан бастаңыз және аяқтаңыз Төмен қуат! The Жасыл білдіреді ЖЕТ! --Жалғастыру және слайдты сахнаға қойыңыз». «Жалғастыру және Дөрекі фокус тұтқасын пайдаланыңыз.” «Жалғастыру және слайдты сахнадан алып тастаңыз». «Жалғастыру және микроскопты қойыңыз ».

ЕСКЕРТПЕ: Микроскопта кейбір түстер басқаша болуы мүмкін. Жоғарыдағы сөйлемнің жанына дұрыс түсті жаз.

4.Слайдты микроскоп сахнасына, үлгіні тікелей үстіне қойыңыз орталық сахнадағы шыны шеңбердің (тікелей жарық үстінде). Сонда сізде үлгіні табудың 10 -нан 9 -ы бар окуляр арқылы қараған бойда!
ЕСКЕРТУ:
Егер сіз кисеңіз көзілдірік, оларды Ал өшірулі егер сіз тек өзіңіздікін көрсеңіз кірпіктер, жылжытыңыз жақынырақ Міндетті түрде болыңыз жабық, немесе жабу сіздің басқа көз !!
ЕСКЕРТУ: Егер сіз а көрсеңіз қараңғы сызық бұл жүреді жартылай жол бойынша көру өрісі, окулярды айналдырып көріңіз. Бұл қараңғы сызық болатын көрсеткіш өте құнды қалаған кезде көрсету саған бірдеңе зертхана серіктесі, немесе сіздің мұғалім!

5.Егер, және тек егер, сіз қосасыз ТӨМЕН ҚУАТ, объективті объективті төмен түсіріңіз ең төменгі нүкте, содан кейін алдымен дөрекі тұтқаны, сосын жұқа фокустау тұтқасын пайдаланып фокустаңыз. Үлгі фокусталған кезде болады ТӨМЕН ҚУАТ мақсаты жақын ең төменгі нүкте, сондықтан сол жерден бастаңыз және назар аударыңыз баяу линзаны көтеру. Егер сіз оны ала алмасаңыз мүлде дөрекі тұтқаны пайдаланып фокусқа келтіріңіз, содан кейін жұқа фокус тұтқасына ауысыңыз.
6.реттеңіз Диафрагма арқылы қарап тұрғаныңызда Окуляр, және сіз мұны көресіз КӨБІРЕК егжей -тегжейі сіз кірген кезде көрінеді АЗДАУ жарық! Аса көп жарық үлгіні береді жуылғансыртқы түрі. КӨРІП КӨРІҢІЗ!!
7.Үлгіні төмен қуаттан тапқаннан кейін (100x), егер арнайы сұрады оны төмен қуатпен тарту үшін, орталық сіздің көзқарасыңыздағы үлгі, содан кейін, фокус тұтқаларын өзгертпей, оны жоғары қуатқа ауыстырыңыз. Үлгіні ортаға салмасаңыз, ауысқанда оны жоғалтасыз Жоғары қуат (сары). [Жоғарыдан қараңыз]

ЕСКЕРТПЕ: Микроскопта кейбір түстер әртүрлі болуы мүмкін. Жоғарыдағы сөйлемнің жанына дұрыс түсті жазыңыз.

8.Қолыңызда болғаннан кейін Жоғары қуат сені ұмытпа тек жақсы фокустау тұтқасын пайдаланыңыз! The Сары білдіреді НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! --Абайлаңыз, тек жақсы фокус тұтқасын пайдаланыңыз.” «Абайлаңыз, жоғары қуат қосулы кезде слайдты алып тастамаңыз.» - - Жоғары қуатты мақсат (430x) - бұл өте жақын слайдқа. Ірі фокустау түймесін қолдану сызат линза және жарықшақ слайд. Көбірек қымбат дыбыстар. . .
9. ЕШҚАШАН ҚЫЗЫЛ ОБЪЕКЗАНЫ ПАЙДАЛАНБАҢЫЗ. Қызыл тоқтату !! - «Тоқта! Ол линзаны пайдаланба!" -- Бұл - майды батыру линзасы. Линзаны майлауға май болмаса, сіз жасайсыз оны құрт! Көбірек қымбат дыбыстар. . . Сондай -ақ, май объективтен көру үшін жеткілікті жарық жинауға көмектесу үшін қажет!

ЕСКЕРТПЕ: Микроскопта кейбір түстер басқаша болуы мүмкін. Жоғарыдағы сөйлемнің жанына дұрыс түсті жаз.

Жақсы сурет салу бойынша кеңестер:

1. Егер сізде сурет болмаса, сурет салуды бастау туралы ойламаңыз ҚАРЫНДАШ! Қалам қаламындағы сызбалар қабылданбайды! Бұл екі себеппен:
а) Сіз аласыз өшіру қарындаш!
(б) Сіз аласыз аймақтарда көлеңке қарындашпен оңайырақ.
2. Әрбір сызба болуы керек 1/2 бет көлемі бойынша және анық және сәйкес белгілер болуы керек! Әр шеңбердің сол жақ жоғарғы бұрышына үлгінің аты кіреді слайд жапсырмасында жазылғандай. Жоғарғы оң жақ бұрышқа ұлғайту (100x немесе 430x).

3. Белгілер басталуы керек сыртта шеңбердің. Шеңбер окуляр арқылы көрінетін көру өрісін көрсетеді. Барлық көрсеткілер келесімен аяқталуы керек the нүкте таңбаланатын объектіге тию!
4.Жануарлар жасушалары болуы керек әрқашан қамтиды шектен асқанда келесісі бес жапсырмалар: Жасуша мембранасы, ядролық мембрана, ядро, хроматин, цитоплазма.
5.Өсімдік жасушалары болуы керек әрқашан қамтиды шектен асқанда келесісі Жеті жапсырмалар: Жасуша мембранасы, жасуша қабырғасы, ядро ​​мембранасы, ядро, хроматин, цитоплазма, хлоропласт (бұл соңғысы жоқ белгілі өсімдік жасушалары).
6.Есіңізде болсын: Бұл сынып шамамен Қосылымдар! Мен сені қаламаймын Қараңыз Мен қалаған ұяшықтарда ҚАРАҢЫЗ олар! Мұны істеу үшін сіз МІНДЕТТІ:

Алған білімдеріңізді қолданыңыз
ұяшық құрылым сызбаларыңызға!
Ан белгісіз сурет артық ештеңе емес
қағаз парағындағы сызаттар!

Тексеріңіз Оқулық қосылды
КӨРІП, КӨРІП КӨРІП!

1.Жинау а жұқа сіздің үлгіңіздің кез келген бөлігін/бөлігін. Үлгіңіз тым қалың болса, жабын сынаманың үстіндегі ара сияқты тербеледі:

2.Орын БІР су тамшысы тікелей үстінде үлгі. Егер сіз қойсаңыз тым көп су үлгінің үстінде лампа судың үстінде қалқып тұрады, бұл үлгіні алуды қиындатады олар көру алаңының жанынан өтіп бара жатқанда!
3.Қаптаманы 45 градус бұрышқа (шамамен), бір шеті су тамшысына тиіп, орналастырыңыз және жіберу.

1.Бір тамшысын салыңыз Метилен көк жапқыштың бір шетінде дақ, ал кесектің жалпақ шеті қағаз сүлгі қаптаманың екінші шетінде. Қағаз сүлгі суды жабын астынан шығарады және судың біртұтастығы (сол көпжылдық таңдаулыларға байланысты - Сутегі Облигациялар) жабын астындағы дақты тартады.

2.Дақ пайда болғаннан кейін үлгісі бар аумақты жабады сен аяқтадың. Дақ жасайды жоқ бүкіл қаптаманың астында болуы керек. Егер дақ қажетті аумақты жаппаса, жаңа қағаз сүлгіні алыңыз және ол пайда болғанша көбірек дақ қосыңыз.
3.Міндетті түрде болыңыз артық дақтарды сүртіңіз қағаз сүлгімен, сондықтан объективті линзаларды бояуды тоқтатпайсыз.
4.Енді сіз слайдты микроскоп сахнасына қоюға дайынсыз. Микроскопты қолдану туралы алдыңғы беттердегі барлық нұсқауларды орындауды ұмытпаңыз.
5.Сызбаларды аяқтағаннан кейін, міндетті түрде жуып, құрғатыңыз екеуі де слайд және лампа және оларды қайтарыңыз дұрыс жерлер!
6.Барлық слайдтарды алып тастау керек тиісті науаларда! Оқушылар кетпейді барлық материалдар дайын болғанша дұрыс. Сен команда!


Гематологиялық зертханада қолданылатын жабдықтар | Гематология | Биология

Келесі тармақтар гематология зертханасында қолданылатын үш негізгі жабдықты көрсетеді. Жабдықтар: 1. Салмақ өлшеуге арналған жабдықтар 2. Центрифуга 3. Эритроциттердің шөгуінің автоматты жылдамдығы.

1. Өлшеу құралдары:

Медициналық зертханада өлшеу құралдары қажет. Олар реагенттерді дайындауға арналған заттарды өлшеу үшін қолданылады.

Таразы таразыларының түрлері:

Аналитикалық тепе-теңдік негізінен екі табақтық баланс болып табылады. Оның қарапайым операциясы бар, оған белгілі бір салмақ жиынтығын бір табаға қосады, ал екінші табаны өлшейтін затпен теңестіреді. Баланстың бұл түрі тепе-теңдіктің өзгеруінен тез жойылады.

Таразының бір ұшына таразысы бар арқалық бекітілген. Затты өлшемей тұрып, шкаланың екінші шетіндегі тұтқаның көмегімен таразы нөлге қойылады. Зат тепе -теңдікке жету үшін таразыны пучкаға жылжыту арқылы өлшенеді. Бұл таразылардың максималды жүктемесі шамамен 206гм, сезімталдығы 1 мг құрайды.

Электроника саласында микро & гипропроцессордың пайда болуы өте сезімтал электронды балансты енгізуге әкелді. Тепе-теңдіктің бұл түрі заттың салмағын электромагниттік күшпен байланыстырады. Бұл электромагниттік өрісте ілулі тұрған электрлік катушкамен қамтамасыз етілген моно-паналық баланс.

Табаға қосылу катушканың қозғалуына әкеледі. Бұл қозғалыс электромагниттік өрістегі электр тогын өзгертеді. Бұл өзгеріс заттың салмағына пропорционалды және индикаторлық жүйемен өлшенеді. Электрондық теңгерім қымбат болса да, дәлдік, жылдамдық және жұмыстың қарапайымдылығын ұсынады.

3. Тікелей оқудың балансы:

Баланстың бұл түрінің екі нұсқасы бар, электрлік немесе электронды. Электрлік қондырғы қымбат емес және берік. Екі нұсқада да қарапайым және жылдам қолданудың бірдей артықшылығы бар, себебі заттың салмағы тікелей оқылатын шкалада көрінеді, сонымен қатар өлшеу ыдысының салмағын өтейтін құрылғы бар.

Зертханалық балансты сақтау:

Зертханалық таразылар – мұқият өңдеуді және тұрақты техникалық қызмет көрсетуді қажет ететін нәзік дәлдіктегі аспаптар. Өндірушінің нұсқаулары мүмкіндігінше орындалуы керек.

Балансты күтіп ұстаудың қарапайым ережелері:

1. Тепе-теңдікті дірілсіз тегіс бетке қойыңыз.

2. Тіреудегі бұрандаларды реттеу арқылы балансты сприт деңгейінің көмегімен теңестіріңіз.

3. Өлшеу алдында таразыны нөлге келтіріңіз.

4. Ыдыс таразысын қолданған кезде салмақ қосу немесе алып тастау үшін қысқыштарды қолданыңыз.

5. Ешқашан ешнәрсені таразының табағына салмаңыз, салмақ қағазын қолданыңыз.

6. Қолданғаннан кейін табаларды щеткамен тазартып, тепе -теңдікті және табаларды химиялық заттардан тазартыңыз.

7. Әрқашан аналитикалық таразы шкафының ішінде кептіргішті ұстаңыз.

8. Баланстың дұрыстығын жүйелі түрде тексеріңіз.

9. Қолданбаған кезде балансты қақпақпен қорғаңыз.

2. Центрифугалық жабдық:

Центрифуга сұйықтықта ілінуі мүмкін жасушалар сияқты бөлшектерді тез тұндыру үшін қолданылады. Принцип мынада: центрифуга ауырлық күшінен үлкен центрифугалық күш (CF) көрсетеді және сұйықтықтағы бөлшектердің тұнбаға айналуына әкеледі.

КФ неғұрлым үлкен болса, шөгу соғұрлым тезірек және тиімдірек болады. Айналу нәтижесіндегі сыртқа тартылу болып табылатын бұл центрифугалық күш минутына айналымдағы центрифугалау жылдамдығына қатысты. Нақты тұнбаға қол жеткізілді.

Центрифугалардың түрі:

Бекітілген бұрышты ротор басы центрифугасында шыныаяқтар немесе түтіктер бекітілген бұрышта ұсталады. Бұл позиция центрифугалау процесін бұрылыс түріне қарағанда жылдамырақ етеді. Сонымен қатар центрифуга тоқтаған кезде тұнба бұзылу ықтималдығы аз.

Ауыстырылатын ротор басындағы шыныаяқтар немесе түтіктер центрифуга қозғалған кезде тік күйде болады, бірақ ауытқып, көлденең болады. Бөлшектер түтіктің түбінде шөгінді болып табылады. Центрифуганың кейбір модельдерінде ауыстырылатын ротор бастары бар.

Центрифугалар модельдерінің түрлері:

Бұл орындыққа бекітілген және тұтқа қолмен бұрылады. Ол тек төмен жылдамдықты береді. Оны қазір электр қуатымен қамтамасыз ету тұрақсыз дамушы елдердің ауылдық жерлерінде кездестіруге болады.

2. Батареямен жұмыс істейтін стендрифуга:

Центрифуганың бұл түрі тұрақты электр қуаты жоқ аймақ үшін өте қолайлы. Бұл көп қуатты қажет етеді, сондықтан батареяны үнемі зарядтау және қайта зарядтау қажет болады.

3. Электр стенді центрифуга:

Бұл медициналық зертханада қолданылатын ең танымал модель және олар әр түрлі мөлшерде және жылдамдық диапазоны әр түрлі модельдерде болады.

4. Микрогематокритті центрифуга:

Бұл оралған қызыл қан жасушаларының көлемін немесе кейбір қан паразиттерінің концентрациясын табу үшін қолданылатын капиллярлық түтіктерді айналдыру үшін қолданылады. Ол электрлік немесе батареямен жұмыс істей алады. Капиллярлық түтіктер қанға толып, центрифуганы айналдырады. РБК толтырылған бағанның пайызы гемтокритті оқу құралы арқылы оқылады. Әдетте, айналдыру уақыты 3, 4 немесе 5 минутқа RCF немесе шамамен 14000g кезінде 10 000 - 15 000 айн / мин жылдамдықта орнатылады.

Центрифуганың бұл түрі үлгіні центрифуганың роторлары тудыратын жылудан қорғай отырып, жоғары жылдамдықпен тоңазытуға мүмкіндік береді. Центрифугалау кезінде бұл центрифуганың негізгі температурасы 15 ° C -тан 25 ° C -қа дейін өзгереді.

Цитоцентрифуга немесе цитоспин - бұл арнайы центрифуга, ол суспензиядағы жасушаларды шыны слайдтағы шеңбермен шектелген жерге тасымалдау үшін қолданылады. Бұл құрал жасуша суспензиясын шоғырландырады және жасуша зақымдануын азайтады.

Гематологиялық анализаторлар:

Гематологиялық анализаторлар қан анализін алу үшін қолданылады. Олар медицина саласында лейкоциттерді, толық қан анализін, ретикулоциттерді талдауды және коагуляция тесттерін жүргізу үшін қолданылады. Адам қанына арналған гематологиялық анализаторлар бар, олар Клиникалық зертханаға және зерттеу зертханаларына пайдалы.

Мүмкіндіктер бір гематологиялық анализатордан екіншісіне өзгереді, мысалы, жабық флаконды сынау және ашық сынаманы сынау. Кейбір гематологиялық анализаторлар пайдаланушыға тестілеудің қолайлы түрін таңдауға мүмкіндік береді.

Гематологиялық анализаторда қарастырылатын басқа мүмкіндіктер - бұл қажетті үлгі өлшемі, тестілеу режимдерінің түрі мен саны, нәтижелердің жылдамдығы, қалыпты ауқымнан тыс нәтижелерді автоматты түрде белгілеу және ол сақтай алатын тест нәтижелерінің сыйымдылығы.

3. Автоматты эритроциттердің шөгу жылдамдығы (ESR) жабдығы:

Бұл қондырғы тиімділігі мен жоғары өнімділігімен танылды.

Эритроциттердің шөгу жылдамдығы (ESR) сағатына миллиметрмен өлшеу арқылы анықталады, эритроциттердің плазмадан бөлінгеннен кейін төмендеген қашықтығы вертикаль: sed- жылдамдықты тамшуырда.

Esr-30 автоматты esr динамикалық анализаторы фотоэлектр технологиясын енгізеді. Ол эритроциттердің орналасуын және микрокомпьютер автоматты түрде басқарылатын қан плазмасының интерфейсін үнемі сканерлеп, тексеріп отырады. Микрокомпьютерде өңделгеннен кейін, деректер үлкен дисплей экранында тікелей көрсетіледі.

Ол негізінен шыны ыдыстарды және басқа да металл құралдарды құрғақ зарарсыздандыру үшін қолданылады.

Күтім және қызмет көрсету:

1. Жылыту кезеңі аяқталған кезде негізгі қосқышты өшіруді ұмытпаңыз.

2. Ыстық ауа пешін қолданғаннан кейін оны дұрыс тазалаңыз.

Олар әр түрлі қоректік орталарда микроорганизмдерді өсіру үшін қолданылады, оны қолданар алдында және кейін мұқият тазалау керек.

Ол белгілі бір температурада әртүрлі химиялық реакцияларды жүргізу үшін қолданылады. Эксперимент талабына байланысты.

Күтім және күтім:

1. Қолданар алдында су моншасы жеткілікті мөлшерде сумен жабдықталуы керек.

2. Қолданғаннан кейін негізгі қосқышты өшіруді ұмытпаңыз.

3. Қолданбаған кезде су моншасын жабыңыз.

мен Микроскоп объектінің дұрыс және үлкейтілген және жақсы анықталған кескіндерін зерттеу үшін қолданылады, олар көзбен байқалмайды.

ii. Матаны жылжыту арқылы жұмсақ шүберекпен мақсаттарды сүртіңіз.


2.3 Микроскопиялық аспаптар

Микроскопияның алғашқы пионерлері микроорганизмдердің көрінбейтін әлеміне терезе ашты. Бірақ микроскопия кейінгі ғасырларда дамуды жалғастырды. 1830 жылы Джозеф Джексон Листер заманауи жарық микроскопын жасады. 20 ғасырда ультракүлгін жарық көзін пайдаланатын флуоресцентті микроскопия және қысқа толқынды электрон сәулелерін пайдаланатын электронды микроскопия сияқты көрінбейтін жарықты пайдаланатын микроскоптар дамыды. Бұл жетістіктер үлкейту, ажыратымдылық және контрастты жақсартуға әкелді. Салыстыру үшін, ван Левенгук пен оның замандастарының салыстырмалы түрде қарапайым микроскоптары қазіргі кезде қолданылатын ең қарапайым микроскоптардан әлдеқайда төмен болды. Бұл бөлімде біз заманауи микроскопиялық технологиялардың кең ауқымын және микроскоптың әр түріне арналған жалпы қосымшаларды қарастырамыз.

Жарық микроскопиясы

Микроскоптардың көптеген түрлері жарық микроскоптар санатына жатады, олар суреттерді визуализациялау үшін жарықты қолданады. Жарық микроскоптарының мысалдарына жарқын өріс микроскоптары, қараңғы өріс микроскоптары, фазалық-контрастты микроскоптар, дифференциалды интерференциялық контрастты микроскоптар, флуоресцентті микроскоптар, конфокалды сканерлейтін лазерлік микроскоптар және екі фотонды микроскоптар жатады. Бұл әртүрлі жарық микроскоптары диагностика мен зерттеулерде бір-бірін толықтыру үшін пайдаланылуы мүмкін.

Жарқын өріс микроскоптары

Жарық өрісінің микроскопы, мүмкін, микроскоптың ең жиі қолданылатын түрі - бұл ашық фонда күңгірт кескін шығаратын екі немесе одан да көп линзалары бар күрделі микроскоп. Кейбір жарық өріс микроскоптары монокулярлы (бір окуляры бар), бірақ жаңа жарық өріс микроскоптарының көпшілігі бинокулярлы (екі окуляры бар), кез келген жағдайда 2.12-суретте көрсетілгендей, әрбір окуляр көз линзасы деп аталатын линзадан тұрады. Көз линзалары әдетте кескіндерді 10 есе үлкейтеді (10⨯). Дене түтігінің екінші ұшында айналмалы мұрындықта объективті линзалар жинағы бар. Бұл объективті линзалардың ұлғаюы әдетте 4⨯ -тен 100⨯ -қа дейін болады, әр линзаның үлкейтуі линзаның металл қаптамасында белгіленген. Көз және объективті линзалар үлкейтілген бейнені жасау үшін бірге жұмыс істейді. Толық үлкейту - бұл көздің үлкейтуінің объективті ұлғайтуға көбейтіндісі:

Мысалы, егер 40⨯ объективті линза таңдалса және көз линзасы 10⨯ болса, жалпы үлкейту

Қаралатын элемент үлгі деп аталады. Үлгі шыны слайдқа қойылады, содан кейін ол микроскоптың сахнасына (платформаға) бекітіледі. Слайд бекітілгеннен кейін, слайдтағы үлгіні x-y механикалық сатылы тұтқалар көмегімен жарықтың үстіне орналастырады. Бұл түймелер сахнаның бетіндегі слайдты жылжытады, бірақ сахнаны көтермейді немесе төмендетпейді. Үлгі жарықтың ортасына қойылғаннан кейін, суретті фокустау үшін сахналық позицияны көтеруге немесе төмендетуге болады. Дөрекі фокустау тұтқасы 4⨯ және 10⨯ объективті линзалармен үлкен масштабты қозғалыстар үшін пайдаланылады.

Кескіндерді үлкейткенде, олар күңгірттенеді, себебі кескіннің бірлігіне азырақ жарық түседі. Микроскоппен жасалған жоғары үлкейтілген суреттер, сондықтан қарқынды жарықтандыруды қажет етеді. Жарық өріс микроскопында бұл жарық әдетте сахнаның астындағы жоғары қарқынды шам болып табылатын сəулелендіру құралы арқылы қамтамасыз етіледі. Сәулелендіру құралынан түсетін жарық конденсатор линзасы (сахнаның астында орналасқан) арқылы өтеді, ол жарықтандыруды барынша арттыру үшін үлгідегі барлық жарық сәулелерін фокустайды. Оңтайлы қашықтық орнатылғаннан кейін конденсатордың орнын бекітілген конденсатордың фокус тұтқасы арқылы оңтайландыруға болады, жарықтығын реттеу үшін конденсаторды жылжытуға болмайды. Егер жарықтың максималды деңгейінен төмен қажет болса, онда үлгіге түсетін жарық мөлшерін конденсатор мен үлгінің арасындағы диафрагманы ашу немесе жабу арқылы оңай реттеуге болады. Кейбір жағдайларда жарықтандырғыштың қарқындылығын реттейтін реостаттың көмегімен реттелуі мүмкін.

Жарық өріс микроскопы сəулелендіру құралының жарығын үлгіге бағыттау арқылы кескін жасайды, бұл жарық әртүрлі құрылымдармен дифференциалды түрде беріледі, жұтылады, шағылысады немесе сынады. Әртүрлі түстер үлгінің бөліктеріндегі хромофорлармен (жарықтың белгілі бір толқын ұзындықтарын жұтатын және көрсететін пигменттер) әрекеттесетіндіктен басқаша әрекет етуі мүмкін. Көбінесе, хромофорлар контраст пен ажыратымдылықты жоғарылатуға қызмет ететін дақтардың көмегімен үлгіге жасанды түрде қосылады. Жалпы үлгідегі құрылымдар жарқын фонға қарағанда күңгіртірек болып, шамамен 1000⨯ ұлғайту кезінде барынша айқын кескіндер жасайды. Әрі қарай үлкейту үлкенірек кескін жасайды, бірақ ажыратымдылығы жоғарыламайды. Бұл бактериялар сияқты кішкентай объектілерді көруге мүмкіндік береді, олар шамамен 400⨯ немесе одан да көп көрінеді, бірақ вирустар сияқты кішірек нысандарды емес.

Өте жоғары үлкейту кезінде жарық үлгі мен линза арасындағы ауаның аз мөлшерінен өткенде ажыратымдылық бұзылуы мүмкін. Бұл ауа мен әйнектің сыну көрсеткіштерінің арасындағы үлкен айырмашылыққа байланысты, линза арқылы фокусталмастан бұрын ауа жарық сәулелерін шашыратады. Бұл мәселені шешу үшін үлгі мен майды батыру линзасы арасындағы аралықты толтыру үшін бір тамшы май қолдануға болады. Майдың сыну көрсеткіші шыныға өте ұқсас болғандықтан, ол үлгіден шыққан жарық линзаға түсетін максималды бұрышты арттырады. Бұл жиналған жарықты және, осылайша, кескіннің ажыратымдылығын арттырады (2.13 -сурет). Әр түрлі жарық үшін әр түрлі майларды қолдануға болады.

Микро қосылымдар

Микроскопқа қызмет көрсету: Үздік тәжірибелер

Тіпті өте қуатты микроскоп, егер ол дұрыс тазаланбаса және күтім жасалмаса, жоғары ажыратымдылықтағы суреттерді жеткізе алмайды. Линзалар жарықты жоғары дәлдікте сыну үшін мұқият ойластырылған және өндірілгендіктен, сәл кірленген немесе сызылған линза да жарықты күтпеген түрде сындырып, үлгінің бейнесін нашарлатады. Сонымен қатар, микроскоптар өте нәзік құралдар болып табылады, сондықтан бөлшектер мен беттерді зақымдамау үшін өте мұқият болу керек. Сонымен қатар, микроскопқа дұрыс күтім жасау мыналарды қамтиды:

  • линзаларды қағаз линзаларымен тазарту
  • линзалардың слайдқа тиюіне жол бермеу (мысалы, фокусты жылдам өзгерту арқылы)
  • шамды (бар болса) сынудан қорғау
  • слайдқа мақсат қоймаңыз
  • 40⨯ немесе одан жоғары объективті объективтерді пайдаланған кезде өрескел фокустау тұтқасын пайдаланбаңыз
  • мамандандырылған майлы мақсатпен, әдетте 100⨯ объективі бар батыру майын ғана қолданыңыз
  • микроскопты қолданғаннан кейін майды батыру линзаларынан тазарту
  • кездейсоқ басқа линзадан алынған майды тазарту
  • микроскопты жабу немесе пайдаланбаған кезде оны шкафқа салу

Оқуға сілтеме

Микроскоптарды қолданумен байланысты имитациялар мен демонстрациялар үшін төмендегі сілтемедегі интернет -ресурсқа кіріңіз. Есіңізде болсын, нақты әдістер мен процедуралардың орындалуы сіз қолданатын нақты құралға байланысты өзгеруі мүмкін. Осылайша, зертханалық жағдайда сарапшылардың бақылауымен нақты микроскоппен үйрену және тәжірибе жасау маңызды.

Darkfield микроскопиясы

Қараңғы өріс микроскопы - конденсатордың кішігірім, бірақ елеулі модификациясы бар жарқын өріс микроскопы. Кішкене мөлдір емес диск (диаметрі шамамен 1 см) жарықтандырғыш пен конденсатор линзасының арасына орналастырылған. Дискі деп аталатын бұл мөлдір емес жарық тоқтағыш жарықтандырғыштан түсетін жарықтың көп бөлігін объектив линзасына өтетін жолда конденсатор арқылы өтеді, ол үлгіге бағытталған жарық қуыс конусын шығарады. Объектке жететін жалғыз жарық - үлгідегі құрылымдар арқылы сынған немесе шағылысқан жарық. Алынған кескін әдетте қараңғы фонда жарқын нысандарды көрсетеді (2.14 -сурет).

Қараңғы өріс микроскопиясы көбінесе дақтарды қолданбай үлгілердің жоғары контрастты, жоғары ажыратымдылықтағы кескіндерін жасай алады, бұл әсіресе дақтармен өліп қалуы немесе басқа жолмен зақымдалуы мүмкін тірі үлгілерді көру үшін пайдалы. Мысалы, жұқа спирохеттер ұнайды Трепонема бозғылт , мерездің қоздырғышы, қараңғы өріс микроскопының көмегімен жақсы қаралуы мүмкін (2.15 -сурет).

Сіздің түсінігіңізді тексеріңіз

Клиникалық фокус

2 -бөлім

Синди сияқты жаралы инфекцияларға әр түрлі бактериялар себеп болуы мүмкін, олардың кейбіреулері ауыр асқынулармен тез таралуы мүмкін. Нақты себебін анықтау үшін бактериялардың өлуіне немесе тоқтауына әсер ететін дәріні таңдау өте маңызды.

Синдидің жағдайы туралы жергілікті дәрігерді шақырғаннан кейін, лагерь медбикесі жарадан алынған үлгіні ең жақын медициналық зертханаға жібереді. Өкінішке орай, лагерь шалғай ауданда болғандықтан, ең жақын зертхана шағын және нашар жабдықталған. Неғұрлым заманауи зертхана бактерияларды өсіру, өсіру және анықтау үшін басқа әдістерді қолдануы мүмкін, бірақ бұл жағдайда техник үлгіден дымқыл қондырғы жасап, оны жарық өріс микроскопының астында қарауды шешеді. Ылғал қондырғыда слайдқа судың кішкене тамшысы қосылады және объективті линзаның астына қоймас бұрын үлгіні орнында ұстау үшін оның үстіне жабын слип қойылады.

Жарық өріс микроскопының астында техник бактерия жасушаларын әрең көре алады, өйткені олар жарқын фонда мөлдір дерлік. Контрастты жоғарылату үшін техник сəулелендіру құралының үстіне мөлдір емес жарық тоқтатқышты қояды. Алынған қара алаң суреті бактерия жасушаларының сфералық екенін және жүзім сияқты шоғырланғанын көрсетеді.

  • Үлгідегі жасушалардың пішіні мен өсу заңдылықтарын анықтау неге маңызды?
  • Бұл үлгіні қарау үшін микроскопияның тағы қандай түрлері тиімді қолданылуы мүмкін?

Келесі клиникалық фокус жолағына өтіңіз. Алдыңғы клиникалық фокус терезесіне оралыңыз.

Фазалық-контрастты микроскоптар

Фазалық контрастты микроскоптар дақсыз жоғары контрастты, жоғары ажыратымдылықтағы кескіндерді жасау үшін үлгідегі құрылымдардан туындаған сыну мен кедергіні пайдаланады. Бұл үлгі арқылы өтетін жарық сәулелерінің толқын ұзындығын өзгерту арқылы кескін жасайтын микроскоптың ең көне және қарапайым түрі. Толқын ұзындығының өзгертілген жолдарын құру үшін конденсаторда сақиналы тоқтау қолданылады. Сақиналы аялдама объективті линзаға жетпес бұрын үлгіге бағытталған жарық қуыс конусты шығарады. Мақсатта фазалық сақинасы бар фазалық тақта бар. Нәтижесінде жарықтандырғыштан тікелей өтетін жарық фазалық сақина арқылы өтеді, ал сынған немесе сынған жарық пластинадан өтеді. Бұл сақина арқылы өтетін толқындар пластина арқылы өтетін толқын ұзындығының фазасының жартысына жуығын құрайды. Толқындардың шыңдары мен шұңқырлары болғандықтан, олар қосыла алады (егер фазада бірге болса) немесе бір -бірін өшіре алады (егер фазадан тыс болса). Толқын ұзындығы фазадан тыс болғанда, толқын шұңқырлары деструктивті кедергі деп аталатын толқын шыңдарын жояды. Жарықты сындыратын құрылымдар тек жарылмаған жарықтың фонында қараңғы болып көрінеді. Жалпы алғанда, сыну көрсеткіші сияқты ерекшеліктері бар құрылымдар қараңғылық деңгейінде әр түрлі болады (2.16 -сурет).

Дақтарды қажет етпестен контрастты жоғарылататындықтан, тірі үлгілерді бақылау үшін фазалық-контрастты микроскопия жиі қолданылады. Кейбір құрылымдар, мысалы, эукариот жасушаларындағы органеллалар мен прокариот жасушаларындағы эндоспоралар, әсіресе фазалық-контрастты микроскопиямен жақсы көрінеді (2.17-сурет).

Дифференциалды интерференциялық контрастты микроскоптар

Дифференциалды интерференциялық контраст (DIC) микроскоптары (Номарский оптика деп те аталады) фазалық-контрастты микроскоптарға ұқсас, себебі олар үлгінің әр түрлі ерекшеліктері арасындағы контрастты күшейту үшін интерференциялық үлгілерді қолданады. DIC микроскопында толқын қозғалысының бағыты (поляризация) ерекшеленетін екі жарық сәулесі жасалады. Бөренелер үлгіден немесе үлгісіз кеңістіктен өткеннен кейін, олар қайта біріктіріледі және үлгілердің әсерлері арқалықтарды біріктіру нәтижесінде пайда болатын интерференциялық үлгілерде айырмашылықтар туғызады. Бұл үш өлшемді көрінісі бар тірі ағзалардың жоғары контрастты суреттерін береді. Бұл микроскоптар әсіресе тірі, боялмаған үлгілердегі құрылымдарды ажыратуда пайдалы. (2.18 -сурет)

Сіздің түсінігіңізді тексеріңіз

Флуоресцентті микроскоптар

Флуоресцентті микроскоп флуорохромдар деп аталатын флуоресцентті хромофорларды қолданады, олар жарық көзінен энергия сіңіре алады, содан кейін бұл энергияны көрінетін жарық ретінде шығарады. Флуорохромдарға табиғи флуоресцентті заттар (мысалы, хлорофиллдер), сонымен қатар контраст жасау үшін үлгіге қосылатын флуоресцентті дақтар кіреді. Техас қызыл және FITC сияқты бояғыштар фторхромдардың мысалдары болып табылады. Басқа мысалдарға нуклеин қышқылының бояғыштары 4 ', 6'-диамидино-2-фенилиндол (DAPI) және акридин апельсині жатады.

Микроскоп қозу жарығын, әдетте ультракүлгін немесе көк жарық сияқты қысқа толқын ұзындығы бар ЭМР түрін жібереді, хромофорлар қозу жарығын жұтып, ұзағырақ толқын ұзындығы бар көрінетін жарық шығарады. Содан кейін қоздыру жарығы сүзіледі (ішінара ультракүлгін сәуле көзге зиянды болғандықтан) көздің линзасы арқылы тек көрінетін жарық өтеді. Бұл күңгірт фонда ашық түстермен үлгінің кескінін жасайды.

Флуоресцентті микроскоптар клиникалық микробиологияда әсіресе пайдалы. Оларды қоздырғыштарды анықтауға, қоршаған ортадан белгілі бір түрлерді табуға немесе жасуша ішіндегі белгілі бір молекулалар мен құрылымдардың орнын табуға қолдануға болады. Сондай-ақ флуоресценциялық микроскопияның көмегімен тірі жасушаларды өлі жасушалардан ажырату үшін тәсілдер олардың белгілі бір фторхромдарды қабылдауына негізделген. Кейде әртүрлі құрылымдарды немесе мүмкіндіктерді көрсету үшін бір үлгіде бірнеше фторхромдар қолданылады.

Флуоресценциялық микроскопияның ең маңызды қолданбаларының бірі - иммунофлуоресценция деп аталатын әдіс, ол белгілі бір ауру тудыратын микробтарды антиденелердің олармен байланысуын бақылау арқылы анықтау үшін қолданылады. (Антиденелер – иммундық жүйе өндіретін, оларды өлтіру немесе тежеу ​​үшін арнайы патогендерге қосылатын ақуыз молекулалары). DFA-да арнайы антиденелер (мысалы, құтыру вирусын нысанаға алатындар) фторхроммен боялады. Егер үлгіде мақсатты қоздырғыш болса, флуоресцентті микроскоппен қоздырғышпен байланысатын антиденелерді байқауға болады. Бұл бастапқы антидене бояуы деп аталады, өйткені боялған антиденелер патогенге тікелей қосылады.

IFA-да екіншілік антиденелер бастапқы антиденелермен емес, фторхроммен боялады. Екіншілік антиденелер қоздырғышқа тікелей жабыспайды, бірақ олар бастапқы антиденелермен байланысады. Боялмаған біріншілік антиденелер қоздырғышпен байланысқан кезде, флуоресцентті қайталама антиденелердің бастапқы антиденелермен байланысуын байқауға болады. Осылайша, қайталама антиденелер патогенге жанама түрде қосылады. Бірнеше қайталама антиденелер көбінесе бастапқы антиденеге қосыла алатындықтан, IFA үлгіге бекітілген флуоресцентті антиденелердің санын көбейтеді, бұл үлгінің ерекшеліктерін визуализациялауды жеңілдетеді (2.19 -сурет).

Сіздің түсінігіңізді тексеріңіз

Конфокальды микроскоптар

Жарық микроскопиясының басқа түрлері бақылаушыдан бір қашықтыққа максималды түрде бағытталған кескін жасайды (тереңдік немесе z жазықтығы), конфокальды микроскоп лазерді қолдана отырып, бірнеше z-жазықтықты біртіндеп сканерлейді. Бұл әртүрлі тереңдікте көптеген екі өлшемді, жоғары ажыратымдылықтағы кескіндерді шығарады, оларды компьютер үш өлшемді кескінге айналдырады. Флуоресцентті микроскоптардағыдай, флуоресцентті бояулар әдетте контраст пен ажыратымдылықты жоғарылату үшін қолданылады. Кескіннің анықтығы z-жазықтығынан емес кез келген жарықты кетіретін тар апертура арқылы одан әрі жақсартады. Конфокалды микроскоптар биофильмдер сияқты қалың үлгілерді зерттеу үшін өте пайдалы, оларды тірі және бекітілмеген түрде зерттеуге болады (2.20 -сурет).

Оқуға сілтеме

Конфокальды микроскоппен бақыланатын биофильмнің айналатын үш өлшемді көрінісін зерттеңіз. Веб -бетке өткеннен кейін бейнені іске қосу үшін «ойнату» түймесін басыңыз.

Екі фотонды микроскоптар

Түпнұсқа флуоресцентті және конфокальды микроскоптар үлгілердегі бірегей мүмкіндіктерді жақсырақ көруге мүмкіндік бергенімен, оңтайлы визуализацияға кедергі келтіретін мәселелер әлі де болды. Қалың үлгілерді қарау кезінде флуоресцентті микроскопияның тиімді сезімталдығы әдетте фокустан тыс жарқылмен шектелді, бұл нашар ажыратуға әкелді. Бұл шектеу жұқа (<1 мкм), бұлыңғыр оптикалық кесінділері бар фокустан тыс фондық флуоресценцияны қабылдамау үшін конфокальды саңылауды пайдалану арқылы конфокальды микроскопта айтарлықтай азайтылды. Алайда, тіпті конфокальды микроскоптарда да қалың мата үлгілерін қарау үшін қажетті ажыратымдылық жоқ. These problems were resolved with the development of the two-photon microscope , which uses a scanning technique, fluorochromes, and long-wavelength light (such as infrared) to visualize specimens. Ұзын толқынды жарықпен байланысты төмен энергия фторхромды қоздыру үшін екі фотон бір уақытта бір жерге соқтығысуы керек дегенді білдіреді. Қоздыру сәулесінің төмен энергиясы жасушаларға аз зиян келтіреді, ал қоздырғыш сәуленің ұзын толқын ұзындығы қалың үлгілерге оңай енеді. Бұл екі фотонды микроскопты зақымдалмаған тіндердегі тірі жасушаларды - ми кесектерін, эмбриондарды, тұтас мүшелерді және тіпті бүкіл жануарларды зерттеуге пайдалы етеді.

Қазіргі уақытта екі фотонды микроскоптарды қолдану жоғары клиникалық және зерттеу зертханаларымен шектеледі, себебі аспаптардың бағасы жоғары. Екі фотонды микроскоптың бағасы әдетте 300-500 мың доллар аралығында, ал үлгілерде қолданылатын бояғыштарды қоздыру үшін қолданылатын лазерлер де өте қымбат. Алайда, технология жақсарған сайын, екі фотонды микроскоптар клиникалық жағдайда оңай қол жетімді болуы мүмкін.

Сіздің түсінігіңізді тексеріңіз

Электронды микроскопия

Жарық микроскоптарымен жасалған кескіндердің максималды теориялық шешімі ақыр соңында көрінетін жарықтың толқын ұзындығымен шектеледі. Most light microscopes can only magnify 1000⨯, and a few can magnify up to 1500⨯, but this does not begin to approach the magnifying power of an electron microscope (EM), which uses short-wavelength electron beams rather than light to increase magnification and resolution.

Электрондар, электромагниттік сәулелену сияқты, толқын сияқты әрекет ете алады, бірақ толқын ұзындығы 0,005 нм болса, олар көрінетін жарыққа қарағанда әлдеқайда жақсы ажыратымдылық жасай алады. ЭМ 100,000⨯ дейін үлкейтілген айқын кескін шығара алады. Thus, EMs can resolve subcellular structures as well as some molecular structures (e.g., single strands of DNA) however, electron microscopy cannot be used on living material because of the methods needed to prepare the specimens.

There are two basic types of EM: the transmission electron microscope (TEM) and the scanning electron microscope (SEM) (Figure 2.21). TEM функциясы бойынша жарықтық микроскопқа ұқсас. Алайда, ол магниттік линзаның көмегімен шыны линзаның көмегімен шоғырланған және детекторға проекцияланған электронды сәулені қолданады. Electrons pass through the specimen, and then the detector captures the image (Figure 2.22).

Электрондар TEM үлгісінен өтуі үшін үлгі өте жұқа болуы керек (қалыңдығы 20–100 нм). Кескін үлгінің әртүрлі бөліктеріндегі әртүрлі мөлдірлікке байланысты жасалады. Бұл мөлдірлікті үлгіні электрондары тығыз ауыр металдар сияқты материалдармен бояу арқылы арттыруға болады. TEM сәуле мен үлгінің вакуумда болуын және үлгінің өте жұқа және сусыздануын талап етеді. ЭМ бақылауына үлгіні дайындау үшін қажет нақты қадамдар келесі бөлімде егжей -тегжейлі талқыланады.

SEM үлгілердің беттерінің кескіндерін жасайды, әдетте үлгілерді электрондар шоғымен қағып алған электрондардан. This can create highly detailed images with a three-dimensional appearance that are displayed on a monitor (Figure 2.23). Әдетте, үлгілер кептіріліп, алтын сияқты жұқа метал қабатымен бүрікпестен бұрын кептіруге болатын артефактілерді азайтатын бекіткіштермен дайындалады. Whereas transmission electron microscopy requires very thin sections and allows one to see internal structures such as organelles and the interior of membranes, scanning electron microscopy can be used to view the surfaces of larger objects (such as a pollen grain) as well as the surfaces of very small samples (Figure 2.24). Some EMs can magnify an image up to 2,000,000⨯. 1

Сіздің түсінігіңізді тексеріңіз

  • Электронды микроскопияның микробиологиялық үлгілерді зерттеуге қарағанда жарық микроскопиядан айырмашылығы қандай артықшылықтары мен кемшіліктері бар?
  • TEM көмегімен қандай үлгілер жақсы зерттеледі? SEM?

Micro Connections

Using Microscopy to Study Biofilms

Биопленка - бұл бір немесе бірнеше микроорганизм түрлерінің күрделі бірлестігі, әдетте бетке немесе беттер арасындағы интерфейске (мысалы, ауа арасындағы) жабысатын экстраполимерлі заттың (EPS) өндірісі нәтижесінде бетіне жабысатын шырышты жабын ретінде пайда болады. және су). In nature, biofilms are abundant and frequently occupy complex niches within ecosystems (Figure 2.25). In medicine, biofilms can coat medical devices and exist within the body. Олардың иммундық жүйеге және микробқа қарсы препараттарға төзімділігінің жоғарылауы сияқты бірегей сипаттамаларға ие болғандықтан, биофильмдер микробиологтар мен клиникалардың ерекше қызығушылығын тудырады.

Because biofilms are thick, they cannot be observed very well using light microscopy slicing a biofilm to create a thinner specimen might kill or disturb the microbial community. Конфокалды микроскопия биофильмдердің айқын суреттерін береді, себебі ол бір уақытта бір z жазықтығына шоғырланып, қалың үлгінің үш өлшемді бейнесін шығара алады. Флуоресцентті бояғыштар матрицадағы жасушаларды анықтауға көмектеседі. Additionally, techniques such as immunofluorescence and fluorescence in situ hybridization (FISH) , in which fluorescent probes are used to bind to DNA, can be used.

Электронды микроскопияны биофильмдерді бақылау үшін қолдануға болады, бірақ үлгіні сусыздандырғаннан кейін, ол қажетсіз артефакттерді шығарады және үлгіні бұрмалайды. In addition to these approaches, it is possible to follow water currents through the shapes (such as cones and mushrooms) of biofilms, using video of the movement of fluorescently coated beads (Figure 2.26).

Сканерлеуші ​​зонд микроскопиясы

Сканерлейтін зонд микроскопы жарық пен электронды пайдаланбайды, бірақ үлгінің бетінен өтіп, онымен тікелей әрекеттесетін өте өткір зондтар. Бұл 100,000,000⨯ дейін үлкейтуге болатын суреттерге жиналатын ақпаратты шығарады. Мұндай үлкен үлкейтулерді беттердегі жеке атомдарды бақылау үшін пайдалануға болады. Осы уақытқа дейін бұл әдістер диагностика үшін емес, ең алдымен зерттеу үшін қолданылған.

There are two types of scanning probe microscope: the scanning tunneling microscope (STM) and the atomic force microscope (AFM). STM үлгіден жоғары берілетін зондты қолданады, себебі тұрақты кернеу зонд пен үлгі арасындағы электр тогының потенциалын тудырады. Бұл ток зонд пен үлгі арасындағы электрондарды кванттық туннель арқылы жүреді, ал ток күші зонд пен үлгі арасындағы қашықтыққа байланысты. Зонд бетінің үстінен көлденең қозғалады және токтың қарқындылығы өлшенеді. Сканерлеуші ​​туннельдік микроскопия беттердің құрылымын жеке атомдарды анықтауға болатын ажыратымдылықпен тиімді картаға түсіре алады.

STM сияқты, AFM -де үлгінің үстінен өтетін жұқа зонд бар. Дегенмен, үлгінің үстіндегі тұрақты биіктіктегі токтағы өзгерістерді өлшеудің орнына, AFM тұрақты ток орнатады және үлгінің үстінен өткен кезде зонд ұшының биіктігіндегі өзгерістерді өлшейді. Зондтың ұшын үлгінің үстінен өткізгенде, атомдар арасындағы күштер (ван дер Ваальс күштері, капиллярлық күштер, химиялық байланыс, электростатикалық күштер және т.б.) оның жоғары және төмен жылжуына әкеледі. Deflection of the probe tip is determined and measured using Hooke’s law of elasticity , and this information is used to construct images of the surface of the specimen with resolution at the atomic level (Figure 2.27).

Figure 2.28, Figure 2.29, and Figure 2.30 summarize the microscopy techniques for light microscopes, electron microscopes, and scanning probe microscopes, respectively.

Сіздің түсінігіңізді тексеріңіз

  • Қайсысының ұлғаюы жоғары, жарық микроскопы немесе сканерлеуші ​​зондты микроскоп?
  • Зонд микроскопиясының бір артықшылығы мен бір шектеуін атаңыз.

Сілтемелер

    “JEM-ARM200F Transmission Electron Microscope,” JEOL USA Inc, http://www.jeolusa.com/PRODUCTS/TransmissionElectronMicroscopes%28TEM%29/200kV/JEM-ARM200F/tabid/663/Default.aspx#195028-specifications. Қолданылған күні 28/8/2015.

Amazon Associate ретінде біз білікті сатып алудан табамыз.

Осы кітапты келтіргіңіз, бөліскіңіз немесе өзгерткіңіз келе ме? Бұл кітап Creative Commons Attribution License 4.0 болып табылады және сіз OpenStax атрибуты қажет.

    Егер сіз осы кітапты толығымен немесе бір бөлігін басып шығару пішімінде қайта таратып жатсаңыз, әрбір физикалық бетте келесі атрибутты қосуыңыз керек:

  • Дәйексөз жасау үшін төмендегі ақпаратты пайдаланыңыз. Біз осы сияқты дәйексөз құралын қолдануды ұсынамыз.
    • Авторлары: Нина Паркер, Марк Шнеегурт, Анх-Хуэ Тхи Ту, Филип Листер, Брайан М.Форстер
    • Баспа/веб -сайт: OpenStax
    • Кітап атауы: Микробиология
    • Жарияланған күні: 01.11.2016 ж
    • Орналасқан жері: Хьюстон, Техас
    • Кітаптың URL мекенжайы: https://openstax.org/books/microbiology/pages/1-introduction
    • Section URL: https://openstax.org/books/microbiology/pages/2-3-instruments-of-microscopy

    © 20 тамыз, 2020 OpenStax. OpenStax шығарған оқулық мазмұны Creative Commons Attribution License 4.0 лицензиясы бойынша лицензияланған. OpenStax атауы, OpenStax логотипі, OpenStax кітап мұқабалары, OpenStax CNX атауы және OpenStax CNX логотипі Creative Commons лицензиясына жатпайды және Райс университетінің алдын ала және тікелей жазбаша келісімінсіз көшіруге болмайды.